กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

จาก Wikipedia สารานุกรมเสรี
ข้ามไปที่การนำทางข้ามไปที่การค้นหา

กล้องจุลทรรศน์แสงทันสมัยพร้อมหลอดปรอทสำหรับกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง กล้องจุลทรรศน์มีกล้องดิจิตอลที่เชื่อมต่อกับคอมพิวเตอร์

กล้องจุลทรรศน์ยังเรียกว่าเป็นกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงเป็นประเภทของกล้องจุลทรรศน์ที่มักใช้แสงที่มองเห็นและระบบของเลนส์เพื่อสร้างภาพขยายของวัตถุขนาดเล็ก กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงเป็นการออกแบบที่เก่าแก่ที่สุดของกล้องจุลทรรศน์และอาจถูกประดิษฐ์ขึ้นในรูปแบบสารประกอบปัจจุบันในศตวรรษที่ 17 กล้องจุลทรรศน์แสงพื้นฐานได้ง่ายมากแม้ว่าการออกแบบที่ซับซ้อนหลายจุดมุ่งหมายเพื่อปรับปรุงความละเอียดและตัวอย่างความคมชัด

วัตถุวางอยู่บนเวทีและอาจมองโดยตรงผ่านช่องมองภาพหนึ่งหรือสองชิ้นบนกล้องจุลทรรศน์ ในกล้องจุลทรรศน์กำลังสูงโดยทั่วไปแล้วช่องมองภาพทั้งสองจะแสดงภาพเดียวกัน แต่เมื่อใช้กล้องจุลทรรศน์สเตอริโอจะใช้ภาพที่แตกต่างกันเล็กน้อยเพื่อสร้างเอฟเฟกต์ 3 มิติ โดยทั่วไปกล้องจะใช้เพื่อจับภาพ ( บอร์ด )

ตัวอย่างสามารถสว่างได้หลายวิธี วัตถุโปร่งใสสามารถส่องสว่างจากด้านล่างและวัตถุทึบสามารถสว่างโดยมีแสงผ่านเข้ามา ( ช่องสว่าง ) หรือรอบ ๆ ( สนามมืด ) เลนส์ใกล้วัตถุอาจใช้แสงโพลาไรซ์เพื่อกำหนดแนวคริสตัลของวัตถุที่เป็นโลหะการถ่ายภาพเฟสคอนทราสต์สามารถใช้เพื่อเพิ่มความเปรียบต่างของภาพโดยเน้นรายละเอียดเล็กน้อยของดัชนีการหักเหของแสงที่แตกต่างกัน

โดยทั่วไปแล้วเลนส์ใกล้วัตถุที่มีกำลังขยายต่างกันจะติดตั้งอยู่บนป้อมปืนทำให้สามารถหมุนเข้าที่และให้ความสามารถในการซูมเข้า โดยทั่วไปกำลังขยายสูงสุดของกล้องจุลทรรศน์แบบออปติคัลจะ จำกัด อยู่ที่ประมาณ 1,000x เนื่องจากกำลังขยายที่ จำกัด ของแสงที่มองเห็นได้ การขยายของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบผสมเป็นผลคูณของการขยายของเลนส์ใกล้ตา (พูดว่า 10x) และเลนส์ใกล้วัตถุ (พูดว่า 100x) เพื่อให้ได้กำลังขยายรวม 1,000 × สภาพแวดล้อมที่ปรับเปลี่ยนเช่นการใช้น้ำมันหรือแสงอัลตราไวโอเลตสามารถเพิ่มการขยายได้

ทางเลือกอื่นสำหรับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงซึ่งไม่ใช้แสงที่มองเห็น ได้แก่กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดและกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องผ่านและกล้องจุลทรรศน์โพรบแบบสแกนและด้วยเหตุนี้จึงสามารถขยายได้มากขึ้น

ประเภท[ แก้ไข]

แผนภาพของกล้องจุลทรรศน์ธรรมดา

กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงมีสองประเภทพื้นฐาน ได้แก่ กล้องจุลทรรศน์ธรรมดาและกล้องจุลทรรศน์แบบผสม กล้องจุลทรรศน์ธรรมดาใช้พลังแสงของเลนส์เดี่ยวหรือกลุ่มเลนส์ในการขยาย กล้องจุลทรรศน์แบบประกอบใช้ระบบของเลนส์ (ชุดหนึ่งขยายภาพที่ผลิตโดยอีกชุดหนึ่ง) เพื่อให้ได้กำลังขยายของวัตถุที่สูงขึ้นมาก กล้องจุลทรรศน์สำหรับการวิจัยสมัยใหม่ส่วนใหญ่เป็นกล้องจุลทรรศน์แบบผสมในขณะที่กล้องจุลทรรศน์ดิจิทัลเชิงพาณิชย์ที่ราคาถูกกว่าบางตัวเป็นกล้องจุลทรรศน์เลนส์เดี่ยวธรรมดา กล้องจุลทรรศน์แบบผสมสามารถแบ่งออกเป็นกล้องจุลทรรศน์ประเภทอื่น ๆ ได้อีกมากมายซึ่งแตกต่างกันไปตามการกำหนดค่าทางแสงค่าใช้จ่ายและวัตถุประสงค์ที่ตั้งใจไว้

กล้องจุลทรรศน์ธรรมดา[ แก้]

กล้องจุลทรรศน์ง่ายใช้เลนส์หรือชุดของเลนส์เพื่อขยายวัตถุที่ผ่านการขยายเชิงมุมเพียงอย่างเดียวให้มุมมองที่ตรงขยายรูปเสมือนจริง [1] [2]การใช้เลนส์นูนเดียวหรือกลุ่มของเลนส์ที่พบในอุปกรณ์ขยายง่ายเช่นแว่นขยาย , loupesและeyepiecesสำหรับกล้องโทรทรรศน์และกล้องจุลทรรศน์

กล้องจุลทรรศน์แบบผสม[ แก้]

แผนภาพของกล้องจุลทรรศน์แบบผสม

กล้องจุลทรรศน์แบบประกอบใช้เลนส์ใกล้กับวัตถุที่กำลังมองเพื่อรวบรวมแสง (เรียกว่าเลนส์ใกล้วัตถุ ) ซึ่งจะโฟกัสภาพจริงของวัตถุภายในกล้องจุลทรรศน์ (ภาพที่ 1) จากนั้นภาพนั้นจะถูกขยายโดยเลนส์ตัวที่สองหรือกลุ่มของเลนส์ (เรียกว่าเลนส์ตา ) ซึ่งจะทำให้ผู้ชมได้ภาพเสมือนของวัตถุที่ขยายกลับด้าน (ภาพที่ 2) [3]การใช้วัตถุผสม / ช่องมองภาพร่วมกันช่วยให้สามารถขยายได้สูงขึ้นมาก กล้องจุลทรรศน์แบบผสมทั่วไปมักมีเลนส์ใกล้วัตถุที่สามารถเปลี่ยนได้ทำให้ผู้ใช้สามารถปรับการขยายได้อย่างรวดเร็ว[3]สารประกอบกล้องจุลทรรศน์ยังช่วยให้การตั้งค่าการส่องสว่างที่สูงขึ้นเช่นความคมชัดเฟส

กล้องจุลทรรศน์รูปแบบอื่น ๆ[ แก้ไข]

มีหลายรูปแบบของการออกแบบกล้องจุลทรรศน์ออปติกแบบผสมสำหรับวัตถุประสงค์เฉพาะ บางส่วนเป็นความแตกต่างของการออกแบบทางกายภาพที่อนุญาตให้มีความเชี่ยวชาญสำหรับวัตถุประสงค์บางประการ:

  • กล้องจุลทรรศน์สเตอริโอซึ่งเป็นกล้องจุลทรรศน์กำลังต่ำซึ่งให้มุมมองแบบสามมิติของตัวอย่างที่นิยมใช้ในการผ่า
  • กล้องจุลทรรศน์เปรียบเทียบซึ่งมีเส้นทางแสงสองทางแยกกันทำให้สามารถเปรียบเทียบสองตัวอย่างโดยตรงผ่านภาพเดียวในแต่ละตา
  • กล้องจุลทรรศน์กลับหัวสำหรับศึกษาตัวอย่างจากด้านล่าง มีประโยชน์สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ในของเหลวหรือสำหรับโลหะวิทยา
  • กล้องจุลทรรศน์ตรวจสอบขั้วต่อไฟเบอร์ออปติกออกแบบมาสำหรับการตรวจสอบปลายหน้าของตัวเชื่อมต่อ
  • เดินทางกล้องจุลทรรศน์สำหรับการศึกษาตัวอย่างสูงละเอียดของแสง

กล้องจุลทรรศน์รูปแบบอื่น ๆ ได้รับการออกแบบสำหรับเทคนิคการส่องสว่างที่แตกต่างกัน:

  • กล้องจุลทรรศน์ Petrographicซึ่งการออกแบบมักจะมีตัวกรองโพลาไรซ์ขั้นตอนการหมุนและแผ่นยิปซั่มเพื่ออำนวยความสะดวกในการศึกษาแร่ธาตุหรือวัสดุที่เป็นผลึกอื่น ๆ ซึ่งคุณสมบัติทางแสงอาจแตกต่างกันไปตามการวางแนว
  • กล้องจุลทรรศน์แบบโพลาไรซ์คล้ายกับกล้องจุลทรรศน์ปิโตรกราฟ
  • กล้องจุลทรรศน์เฟสคอนทราสต์ซึ่งใช้วิธีการส่องสว่างคอนทราสต์เฟส
  • กล้องจุลทรรศน์ Epifluorescenceออกแบบมาสำหรับการวิเคราะห์ตัวอย่างซึ่งรวมถึงฟลูออโรโฟเรส
  • กล้องจุลทรรศน์แบบคอนโฟคอลซึ่งเป็นรูปแบบการส่องสว่างแบบเอฟิฟลูออเรสเซนต์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายซึ่งใช้เลเซอร์สแกนเพื่อส่องตัวอย่างสำหรับการเรืองแสง
  • กล้องจุลทรรศน์สองโฟตอนใช้ในการถ่ายภาพการเรืองแสงที่ลึกลงไปในสื่อกระจายและลดการฟอกสีโดยเฉพาะในตัวอย่างที่มีชีวิต
  • กล้องจุลทรรศน์สำหรับนักเรียน - กล้องจุลทรรศน์พลังงานต่ำมักมีการควบคุมที่เรียบง่ายและบางครั้งเลนส์คุณภาพต่ำได้รับการออกแบบมาเพื่อใช้ในโรงเรียนหรือเป็นเครื่องมือเริ่มต้นสำหรับเด็ก [4]
  • Ultramicroscopeเป็นกล้องจุลทรรศน์แบบปรับแสงที่ใช้การกระเจิงของแสงเพื่อให้สามารถมองเห็นอนุภาคเล็ก ๆ ที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางต่ำกว่าหรือใกล้กับความยาวคลื่นของแสงที่มองเห็นได้ (ประมาณ 500 นาโนเมตร) ส่วนใหญ่ล้าสมัยตั้งแต่การถือกำเนิดของกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
  • กล้องจุลทรรศน์รามานที่ปรับปรุงด้วยทิปเป็นกล้องจุลทรรศน์แบบออปติคัลที่ใช้เทคนิครามานสเปกโทรสโกปีที่ปรับปรุงปลายโดยไม่มีขีดจำกัดความละเอียดตามความยาวคลื่นแบบเดิม [5] [6]กล้องจุลทรรศน์นี้ส่วนใหญ่เกิดขึ้นบนแพลตฟอร์มกล้องจุลทรรศน์แบบสแกน - โพรบโดยใช้เครื่องมือออพติคอลทั้งหมด

กล้องจุลทรรศน์ดิจิตอล[ แก้]

ขนาดเล็กกล้องจุลทรรศน์ USB

กล้องจุลทรรศน์ดิจิตอลเป็นกล้องจุลทรรศน์พร้อมกับกล้องดิจิตอลที่ช่วยให้การสังเกตของตัวอย่างผ่านทางคอมพิวเตอร์กล้องจุลทรรศน์ยังสามารถควบคุมด้วยคอมพิวเตอร์บางส่วนหรือทั้งหมดด้วยระบบอัตโนมัติในระดับต่างๆ กล้องจุลทรรศน์ดิจิทัลช่วยให้สามารถวิเคราะห์ภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์ได้มากขึ้นตัวอย่างเช่นการวัดระยะทางและพื้นที่และการหาปริมาณของคราบ เรืองแสงหรือเนื้อเยื่อวิทยา

กล้องจุลทรรศน์ดิจิตอลที่ใช้พลังงานต่ำไมโครสโคปแบบUSBยังมีจำหน่ายทั่วไป เหล่านี้เป็นหลักเว็บแคมที่มีพลังงานสูงเลนส์มาโครและโดยทั่วไปไม่ได้ใช้transilluminationกล้องเชื่อมต่อโดยตรงกับพอร์ตUSBของคอมพิวเตอร์เพื่อให้ภาพแสดงบนจอภาพโดยตรง มีการขยายที่พอเหมาะ (สูงสุดประมาณ 200 ×) โดยไม่จำเป็นต้องใช้เลนส์ตาและมีต้นทุนที่ต่ำมาก การส่องสว่างกำลังสูงมักมาจากแหล่งกำเนิดLEDหรือแหล่งสัญญาณที่อยู่ติดกับเลนส์กล้อง

กล้องจุลทรรศน์ดิจิตอลที่มีระดับแสงน้อยมากเพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายต่อตัวอย่างทางชีวภาพที่มีช่องโหว่สามารถใช้ได้โดยใช้กล้องดิจิทัลที่มีความไวแสงแบบนับโฟตอน แสดงให้เห็นว่าแหล่งกำเนิดแสงที่ให้โฟตอนพันกันหลายคู่อาจลดความเสี่ยงที่จะเกิดความเสียหายกับตัวอย่างที่ไวต่อแสงมากที่สุด ในการประยุกต์ใช้การถ่ายภาพโกสต์กับกล้องจุลทรรศน์โฟตอนแบบกระจัดกระจายตัวอย่างจะส่องสว่างด้วยโฟตอนอินฟราเรดซึ่งแต่ละตัวอย่างมีความสัมพันธ์เชิงพื้นที่กับคู่หูที่พันกันอยู่ในแถบที่มองเห็นได้เพื่อการถ่ายภาพที่มีประสิทธิภาพโดยกล้องนับโฟตอน [7]

ประวัติ[ แก้ไข]

การประดิษฐ์[ แก้ไข]

กล้องจุลทรรศน์ที่เก่าแก่ที่สุดคือแว่นขยายแบบเลนส์ เดี่ยวที่มีกำลังขยายจำกัด ซึ่งอย่างน้อยก็ย้อนหลังไปถึงการใช้เลนส์ในแว่นตาอย่างแพร่หลายในศตวรรษที่ 13 [8]

กล้องจุลทรรศน์แบบผสมปรากฏครั้งแรกในยุโรปราวปี ค.ศ. 1620 [9] [10]รวมทั้งภาพที่คอร์เนลิสเดร็บเบลแสดงให้เห็นในลอนดอน (ประมาณปี ค.ศ. 1621) และอีกหนึ่งชิ้นที่จัดแสดงในกรุงโรมในปี พ.ศ. 2167 [11] [12]

ไม่ทราบผู้ประดิษฐ์กล้องจุลทรรศน์แบบผสมที่แท้จริงแม้ว่าจะมีการอ้างสิทธิ์มากมายในช่วงหลายปีที่ผ่านมา สิ่งเหล่านี้รวมถึงการอ้างสิทธิ์ 35 [13]ปีหลังจากที่พวกเขาปรากฏตัวโดยโยฮันเนสซาคาเรียสเซนผู้ผลิตแว่นตาชาวดัตช์ที่ซาคาเรียสแจนเซนพ่อของเขาได้ประดิษฐ์กล้องจุลทรรศน์แบบประกอบและ / หรือกล้องโทรทรรศน์ในช่วงต้นปี 1590 โยฮันเนส (บางคนอ้างว่ามีพิรุธ) [14] [15] [16]พยานหลักฐานผลักดันให้เกิดวันที่ประดิษฐ์ย้อนกลับไปว่าซาคาเรียสน่าจะเป็นเด็กในเวลานั้นซึ่งนำไปสู่การคาดเดาว่าโจฮันเนสอ้างว่าเป็นความจริงกล้องจุลทรรศน์แบบผสมจะต้องถูกคิดค้นโดยโจฮันเนส ปู่ Hans Martens [17]ข้อเรียกร้องอีกประการหนึ่งคือคู่แข่งของ JanssenHans Lippershey (ซึ่งยื่นขอสิทธิบัตรกล้องโทรทรรศน์ตัวแรกในปี 1608) ได้ประดิษฐ์กล้องจุลทรรศน์แบบผสม[18]นักประวัติศาสตร์คนอื่น ๆ ชี้ไปที่คอร์เนลิสเดร็บเบลผู้ริเริ่มชาวดัตช์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ประกอบในปี ค.ศ. 1621 [11] [12]

กาลิเลโอกาลิเลอีบางครั้งอ้างว่าเป็นนักประดิษฐ์กล้องจุลทรรศน์แบบผสม หลังจากปี 1610 เขาพบว่าเขาสามารถโฟกัสกล้องโทรทรรศน์ของเขาเพื่อดูวัตถุขนาดเล็กเช่นแมลงวันระยะใกล้[19]และ / หรือสามารถมองผ่านปลายด้านที่ไม่ถูกต้องกลับด้านเพื่อขยายวัตถุขนาดเล็ก[20]ข้อเสียเปรียบเพียงประการเดียวคือกล้องโทรทรรศน์ยาว 2 ฟุตของเขาต้องยื่นออกไป 6 ฟุตเพื่อดูวัตถุที่อยู่ใกล้[21]หลังจากได้เห็นกล้องจุลทรรศน์แบบประกอบที่ Drebbel จัดแสดงในกรุงโรมในปี 1624 กาลิเลโอได้สร้างรุ่นปรับปรุงของตัวเอง[11] [12]ในปี 1625 Giovanni Faber ได้สร้างชื่อกล้องจุลทรรศน์สำหรับกล้องจุลทรรศน์แบบประกอบที่ Galileo ส่งไปยังAccademia dei Linceiในปี 1624 [22] (กาลิเลโอเรียกมันว่า " occhiolino " หรือ " ตาน้อย ") Faber ตั้งชื่อจากคำภาษากรีกว่าμικρόν (ไมครอน) แปลว่า "เล็ก" และσκοπεῖν (skopein) แปลว่า "มอง" ซึ่งเป็นชื่อที่มีความคล้ายคลึงกับ " กล้องโทรทรรศน์ " ซึ่งเป็นอีกหนึ่งคำที่ชาวลินซีตั้งขึ้น[23]

Christiaan Huygensชาวดัตช์อีกพัฒนาง่าย 2 เลนส์ระบบตาในช่วงปลายศตวรรษที่ 17 ที่ถูกachromaticallyแก้ไขและดังนั้นจึงเป็นขั้นตอนมากไปข้างหน้าในการพัฒนากล้องจุลทรรศน์ Huygens ocular ยังคงผลิตอยู่จนถึงทุกวันนี้ แต่ต้องทนทุกข์ทรมานจากขนาดสนามที่เล็กและข้อเสียเล็กน้อยอื่น ๆ

ความนิยม[ แก้ไข]

ภาพตีพิมพ์ที่เก่าแก่ที่สุดที่ทราบว่าสร้างขึ้นด้วยกล้องจุลทรรศน์: ผึ้งโดยFrancesco Stelluti , 1630 [24]

Antonie van Leeuwenhoek (1632–1724) ให้เครดิตกับการนำกล้องจุลทรรศน์ไปสู่ความสนใจของนักชีววิทยาแม้ว่าจะมีการผลิตเลนส์ขยายแบบธรรมดาในศตวรรษที่ 16 แล้วก็ตาม กล้องจุลทรรศน์ทำเองที่บ้านของ Van Leeuwenhoek เป็นกล้องจุลทรรศน์ธรรมดาที่มีเลนส์ขนาดเล็ก แต่แข็งแรงเพียงชิ้นเดียว พวกเขาใช้งานไม่สะดวก แต่ทำให้ Van Leeuwenhoek สามารถดูภาพที่มีรายละเอียดได้ ใช้เวลาประมาณ 150 ปีในการพัฒนาออปติคอลก่อนที่กล้องจุลทรรศน์แบบผสมจะสามารถให้ภาพที่มีคุณภาพเช่นเดียวกับกล้องจุลทรรศน์ธรรมดาของ Van Leeuwenhoek เนื่องจากความยากลำบากในการกำหนดค่าเลนส์หลายตัว ในช่วงทศวรรษที่ 1850 จอห์นลีโอนาร์ดริดเดลล์ศาสตราจารย์วิชาเคมีแห่งมหาวิทยาลัยทูเลนได้คิดค้นกล้องจุลทรรศน์แบบสองตาที่ใช้งานได้จริงเป็นครั้งแรกในขณะที่ดำเนินการตรวจสอบอหิวาตกโรคด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบอเมริกันที่เร็วที่สุดและครอบคลุมที่สุดชนิดหนึ่ง [25] [26]

เทคนิคการจัดแสง[ แก้]

ในขณะที่เทคโนโลยีกล้องจุลทรรศน์ขั้นพื้นฐานและออปติกมีให้บริการมานานกว่า 400 ปีแล้วเมื่อไม่นานมานี้มีการพัฒนาเทคนิคในการส่องสว่างตัวอย่างเพื่อสร้างภาพคุณภาพสูงที่เห็นในปัจจุบัน

ในเดือนสิงหาคม 1893 สิงหาคมKöhlerพัฒนาKöhlerส่องสว่างวิธีการส่องสว่างตัวอย่างนี้ทำให้เกิดแสงที่สม่ำเสมอมากและเอาชนะข้อ จำกัด หลายประการของเทคนิคการส่องสว่างตัวอย่างแบบเก่า ก่อนการพัฒนาการส่องสว่างของKöhlerภาพของแหล่งกำเนิดแสงเช่นหลอดไฟจะปรากฏให้เห็นในภาพของตัวอย่างเสมอ

รางวัลโนเบลในสาขาฟิสิกส์ได้รับรางวัลดัตช์ฟิสิกส์Frits Zernikeในปี 1953 สำหรับการพัฒนาของเขาเฟสความคมชัดความสว่างซึ่งจะช่วยให้การถ่ายภาพของกลุ่มตัวอย่างมีความโปร่งใส โดยใช้การรบกวนมากกว่าการดูดซับแสงตัวอย่างที่โปร่งใสมากเช่นเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่มีชีวิตสามารถถ่ายภาพได้โดยไม่ต้องใช้เทคนิคการย้อมสี เพียงสองปีต่อมาในปีพ. ศ. 2498 Georges Nomarski ได้ตีพิมพ์ทฤษฎีสำหรับกล้องจุลทรรศน์คอนทราสต์การรบกวนที่แตกต่างกันซึ่งเป็นเทคนิคการถ่ายภาพที่ใช้ สัญญาณรบกวนอื่น

กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง[ แก้]

กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพสมัยใหม่ขึ้นอยู่กับการพัฒนาโพรบเรืองแสง สำหรับโครงสร้างเฉพาะภายในเซลล์เป็นอย่างมาก ในทางตรงกันข้ามกับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแบบทรานซิลลูมิเนทปกติในกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงตัวอย่างจะถูกส่องผ่านเลนส์ใกล้วัตถุด้วยชุดแสงที่มีความยาวคลื่นแคบ แสงนี้ทำปฏิกิริยากับฟลูออรีนในตัวอย่างซึ่งจะเปล่งแสงที่มีความยาวคลื่นยาวขึ้น นี่คือแสงที่เปล่งออกมาซึ่งประกอบเป็นภาพ

ตั้งแต่ช่วงกลางศตวรรษที่ 20 คราบสารเคมีเรืองแสงเช่นDAPIที่จับกับDNAถูกนำมาใช้เพื่อติดฉลากโครงสร้างเฉพาะภายในเซลล์ การพัฒนาล่าสุด ได้แก่ อิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ซึ่งใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากเรืองแสงเพื่อจดจำโปรตีนที่เฉพาะเจาะจงภายในตัวอย่างและโปรตีนเรืองแสงเช่นGFPซึ่งเซลล์ที่มีชีวิตสามารถแสดงออกได้ทำให้มันเรืองแสง

ส่วนประกอบ[ แก้ไข]

องค์ประกอบกล้องจุลทรรศน์การส่งผ่านแสงขั้นพื้นฐาน (1990s)

กล้องจุลทรรศน์แบบออปติคัลสมัยใหม่ทั้งหมดที่ออกแบบมาสำหรับการดูตัวอย่างโดยแสงที่ส่งผ่านมีส่วนประกอบพื้นฐานของเส้นทางแสงเหมือนกัน นอกจากนี้กล้องจุลทรรศน์ส่วนใหญ่มีส่วนประกอบ 'โครงสร้าง' เหมือนกัน[27] (มีหมายเลขด้านล่างตามภาพด้านขวา):

  • เลนส์ใกล้ตา (เลนส์ตา) (1)
  • ป้อมปืนวัตถุประสงค์ปืนลูกโม่หรือชิ้นส่วนจมูกที่หมุนได้ (เพื่อใส่เลนส์ใกล้วัตถุหลายชิ้น) (2)
  • เลนส์ใกล้วัตถุ (3)
  • ปุ่มปรับโฟกัส (เพื่อย้ายพื้นที่งาน)
    • การปรับหยาบ (4)
    • การปรับละเอียด (5)
  • เวที (เพื่อเก็บชิ้นงาน) (6)
  • แหล่งกำเนิดแสง ( แสงหรือกระจก ) (7)
  • ไดอะแฟรมและคอนเดนเซอร์ (8)
  • เวทีเครื่องกล (9)

เลนส์ใกล้ตา (เลนส์ตา) [ แก้ไข]

ช่องมองภาพหรือเลนส์ตาเป็นรูปทรงกระบอกที่มีสองคนหรือมากกว่าเลนส์; หน้าที่ของมันคือการนำภาพเข้าสู่โฟกัสสำหรับดวงตา ช่องมองภาพถูกสอดเข้าไปที่ปลายด้านบนของท่อลำตัว ช่องมองภาพสามารถใช้แทนกันได้และสามารถใส่ช่องมองภาพได้หลายแบบด้วยองศาการขยายที่แตกต่างกัน ค่ากำลังขยายโดยทั่วไปสำหรับเลนส์ตา ได้แก่ 5 ×, 10 × (ค่าที่พบบ่อยที่สุด), 15 ×และ 20 × ในกล้องจุลทรรศน์ประสิทธิภาพสูงบางรุ่นการกำหนดค่าออปติคอลของเลนส์ใกล้วัตถุและเลนส์ใกล้ตาจะถูกจับคู่กันเพื่อให้ได้ประสิทธิภาพทางแสงที่ดีที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้ นี้เกิดขึ้นมากที่สุดกับapochromaticวัตถุประสงค์

ป้อมปืนวัตถุประสงค์ (ปืนพกหรือชิ้นส่วนจมูกหมุน) [ แก้ไข]

ป้อมปืนวัตถุประสงค์ปืนลูกโม่หรือชิ้นส่วนจมูกหมุนเป็นส่วนที่เก็บชุดของเลนส์ใกล้วัตถุ ช่วยให้ผู้ใช้สามารถสลับระหว่างเลนส์ใกล้วัตถุได้

เลนส์ใกล้วัตถุ[ แก้ไข]

ที่ปลายล่างของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงทั่วไปจะมีเลนส์ใกล้วัตถุหนึ่งชิ้นหรือมากกว่าที่เก็บแสงจากตัวอย่าง วัตถุประสงค์มักจะอยู่ในตัวเรือนทรงกระบอกที่มีเลนส์ผสมแก้วเดียวหรือหลายองค์ประกอบ โดยทั่วไปจะมีเลนส์ใกล้วัตถุประมาณสามชิ้นที่ถูกขันเข้ากับชิ้นส่วนจมูกทรงกลมซึ่งอาจหมุนได้เพื่อเลือกเลนส์ใกล้วัตถุที่ต้องการ การเตรียมการเหล่านี้ถูกออกแบบมาให้parfocalซึ่งหมายความว่าเมื่อมีการเปลี่ยนแปลงจากเลนส์หนึ่งไปยังอีกในกล้องจุลทรรศน์ที่เข้าพักตัวอย่างในโฟกัสวัตถุประสงค์ของกล้องจุลทรรศน์มีลักษณะสองพารามิเตอร์คือการขยายและรูรับแสงที่เป็นตัวเลข. โดยทั่วไปแล้วจะอยู่ในช่วงตั้งแต่ 5 ×ถึง 100 ×ในขณะที่ช่วงหลังมีตั้งแต่ 0.14 ถึง 0.7 ซึ่งสอดคล้องกับทางยาวโฟกัสประมาณ 40 ถึง 2 มม. เลนส์ใกล้วัตถุที่มีกำลังขยายสูงกว่าโดยปกติจะมีรูรับแสงที่เป็นตัวเลขสูงกว่าและระยะชัดลึกที่สั้นกว่าในภาพที่ได้ เลนส์ใกล้วัตถุที่มีประสิทธิภาพสูงบางรุ่นอาจต้องใช้ช่องมองภาพที่ตรงกันเพื่อให้ได้ประสิทธิภาพด้านแสงที่ดีที่สุด

วัตถุประสงค์ในการแช่น้ำมัน[ แก้ไข]

เลนส์ใกล้วัตถุด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบแช่น้ำมัน Leica สองตัว: 100 × (ซ้าย) และ 40 × (ขวา)

กล้องจุลทรรศน์บางตัวใช้ประโยชน์จากวัตถุประสงค์ในการแช่น้ำมันหรือวัตถุประสงค์ในการแช่น้ำเพื่อให้ได้ความละเอียดมากขึ้นด้วยกำลังขยายสูง สิ่งเหล่านี้ใช้กับวัสดุที่ตรงกับดัชนีเช่นน้ำมันแช่หรือน้ำและใบปิดที่จับคู่ระหว่างเลนส์ใกล้วัตถุและตัวอย่าง ดัชนีการหักเหของแสงของวัสดุจับคู่ดัชนีสูงกว่าอากาศทำให้เลนส์ใกล้วัตถุมีรูรับแสงตัวเลขที่ใหญ่กว่า (มากกว่า 1) เพื่อให้แสงถูกส่งจากชิ้นงานไปยังใบหน้าด้านนอกของเลนส์ใกล้วัตถุโดยมีการหักเหน้อยที่สุด สามารถรับรูรับแสงที่เป็นตัวเลขได้สูงถึง 1.6 [28]รูรับแสงตัวเลขที่ใหญ่ขึ้นช่วยให้สามารถรวบรวมแสงได้มากขึ้นทำให้สามารถสังเกตรายละเอียดที่เล็กลงได้อย่างละเอียด เลนส์แช่น้ำมันมักมีกำลังขยาย 40 ถึง 100 ×

ปุ่มปรับโฟกัส[ แก้ไข]

ปุ่มปรับเลื่อนระยะขึ้นและลงพร้อมการปรับแยกสำหรับการโฟกัสหยาบและแบบละเอียด การควบคุมเดียวกันทำให้กล้องจุลทรรศน์สามารถปรับให้เข้ากับชิ้นงานที่มีความหนาต่างกันได้ ในการออกแบบกล้องจุลทรรศน์รุ่นเก่าล้อปรับโฟกัสจะเลื่อนหลอดกล้องจุลทรรศน์ขึ้นหรือลงโดยสัมพันธ์กับขาตั้งและมีระยะคงที่

กรอบ[ แก้ไข]

ชุดประกอบออพติคอลทั้งหมดติดอยู่กับแขนแข็งแบบดั้งเดิมซึ่งจะยึดเข้ากับเท้ารูปตัวยูที่แข็งแรงเพื่อให้มีความแข็งแกร่งที่จำเป็น มุมแขนสามารถปรับได้เพื่อให้สามารถปรับมุมมองได้

กรอบมีจุดยึดสำหรับตัวควบคุมกล้องจุลทรรศน์ต่างๆ โดยปกติจะรวมถึงการควบคุมสำหรับการโฟกัสโดยทั่วไปจะเป็นวงล้อขนาดใหญ่เพื่อปรับโฟกัสหยาบร่วมกับวงล้อที่มีขนาดเล็กลงเพื่อควบคุมโฟกัสที่ละเอียด คุณสมบัติอื่น ๆ อาจเป็นตัวควบคุมหลอดไฟและ / หรือตัวควบคุมสำหรับปรับคอนเดนเซอร์

เวที[ แก้ไข]

เวทีดังกล่าวเป็นเวทีที่อยู่ด้านล่างของเลนส์ใกล้วัตถุซึ่งรองรับชิ้นงานที่กำลังดูอยู่ ตรงกลางเวทีเป็นช่องที่แสงผ่านเพื่อส่องชิ้นงาน เวทีมักจะมีแขนสำหรับถือสไลด์ (แผ่นกระจกสี่เหลี่ยมที่มีขนาดทั่วไป 25 × 75 มม. ซึ่งติดตั้งชิ้นงาน)

ที่กำลังขยายสูงกว่า 100 ×การเลื่อนสไลด์ด้วยมือไม่สามารถทำได้จริง ขั้นตอนเชิงกลโดยทั่วไปของกล้องจุลทรรศน์ขนาดกลางและราคาสูงกว่าช่วยให้สามารถเคลื่อนสไลด์ได้เล็กน้อยผ่านปุ่มควบคุมที่จัดตำแหน่งตัวอย่าง / สไลด์ตามที่ต้องการ หาก แต่เดิมกล้องจุลทรรศน์ไม่มีขั้นตอนเชิงกลอาจเป็นไปได้ที่จะเพิ่มเข้าไป

ทุกขั้นตอนจะเลื่อนขึ้นและลงเพื่อโฟกัส ด้วยสไลด์สเตจเชิงกลเลื่อนไปบนแกนแนวนอนสองแกนเพื่อวางตำแหน่งชิ้นงานเพื่อตรวจสอบรายละเอียดของชิ้นงานทดสอบ

การโฟกัสเริ่มต้นที่กำลังขยายต่ำกว่าเพื่อให้ชิ้นงานอยู่ตรงกลางบนพื้นที่งาน การย้ายไปยังการขยายที่สูงขึ้นจำเป็นต้องเลื่อนระยะให้สูงขึ้นในแนวตั้งเพื่อทำการโฟกัสซ้ำที่อัตราขยายที่สูงขึ้นและอาจต้องมีการปรับตำแหน่งของชิ้นงานในแนวนอนเล็กน้อย การปรับตำแหน่งชิ้นงานในแนวนอนเป็นเหตุผลที่ทำให้มีสเตจเชิงกล

เนื่องจากความยากลำบากในการเตรียมชิ้นงานและการติดตั้งบนสไลด์สำหรับเด็กควรเริ่มต้นด้วยสไลด์ที่เตรียมไว้ซึ่งอยู่กึ่งกลางและโฟกัสได้ง่ายโดยไม่คำนึงถึงระดับโฟกัสที่ใช้

แหล่งกำเนิดแสง[ แก้ไข]

สามารถใช้แหล่งกำเนิดแสงได้หลายแหล่ง แสงกลางวันจะส่องผ่านกระจกอย่างง่ายที่สุด อย่างไรก็ตามกล้องจุลทรรศน์ส่วนใหญ่มีแหล่งกำเนิดแสงที่ปรับเปลี่ยนได้และควบคุมได้ของตัวเองซึ่งมักเป็นหลอดฮาโลเจนแม้ว่าการส่องสว่างโดยใช้LEDและเลเซอร์จะกลายเป็นปัจจัยที่ใช้กันทั่วไปมากขึ้น การส่องสว่างของKöhlerมักมีให้กับเครื่องมือที่มีราคาแพงกว่า

คอนเดนเซอร์[ แก้ไข]

คอนเดนเซอร์เป็นเลนส์ที่ออกแบบมาเพื่อเน้นแสงจากแหล่งกำเนิดแสงลงบนตัวอย่าง คอนเดนเซอร์อาจมีคุณสมบัติอื่น ๆ เช่นไดอะแฟรมและ / หรือฟิลเตอร์เพื่อจัดการคุณภาพและความเข้มของการส่องสว่าง เพื่อให้ความสว่างเทคนิคเช่นสนามมืด , ความคมชัดขั้นตอนและค่าการรบกวนความคมชัดกล้องจุลทรรศน์องค์ประกอบแสงเพิ่มเติมต้องถูกจัดตำแหน่งได้อย่างแม่นยำในเส้นทางแสง

การขยาย[ แก้ไข]

กำลังหรือกำลังขยายที่แท้จริงของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงเชิงประกอบเป็นผลมาจากพลังของตา ( เลนส์ตา) และเลนส์ใกล้วัตถุ กำลังขยายปกติสูงสุดของตาและวัตถุประสงค์คือ 10 ×และ 100 ×ตามลำดับโดยให้กำลังขยายสุดท้าย 1,000 ×

การขยายและบอร์ด[ แก้ไข]

เมื่อใช้กล้องเพื่อจับภาพบอร์ดการขยายภาพที่มีประสิทธิภาพจะต้องคำนึงถึงขนาดของภาพด้วย นี้เป็นอิสระไม่ว่าจะเป็นในการพิมพ์จากเชิงลบภาพยนตร์หรือแสดงแบบดิจิทัลบนหน้าจอคอมพิวเตอร์

ในกรณีของกล้องฟิล์มการถ่ายภาพการคำนวณนั้นง่ายมาก การขยายขั้นสุดท้ายเป็นผลมาจากการขยายเลนส์ใกล้วัตถุการขยายเลนส์ของกล้องและปัจจัยการขยายของการพิมพ์ฟิล์มเมื่อเทียบกับค่าลบ ค่าโดยทั่วไปของปัจจัยการขยายจะอยู่ที่ประมาณ 5 × (สำหรับกรณีฟิล์ม 35 มม.และการพิมพ์ 15 × 10 ซม. (6 × 4 นิ้ว))

ในกรณีของกล้องดิจิทัลจะต้องทราบขนาดของพิกเซลในเครื่องตรวจจับCMOSหรือCCDและขนาดของพิกเซลบนหน้าจอ จากนั้นสามารถคำนวณปัจจัยการขยายจากตัวตรวจจับไปยังพิกเซลบนหน้าจอได้ เช่นเดียวกับกล้องฟิล์มการขยายขั้นสุดท้ายเป็นผลมาจากการขยายเลนส์ใกล้วัตถุการขยายเลนส์ของกล้องและปัจจัยการขยาย

การดำเนินการ[ แก้ไข]

เจ้าหน้าที่ สำนักงานปฏิบัติการภาคสนามCBP ของสหรัฐฯกำลังตรวจสอบความถูกต้องของเอกสารการเดินทางที่สนามบินนานาชาติโดยใช้กล้องจุลทรรศน์สเตอริโอ

เทคนิคการส่องสว่าง[ แก้ไข]

มีเทคนิคมากมายที่ปรับเปลี่ยนเส้นทางแสงเพื่อสร้างภาพคอนทราสต์ที่ดีขึ้นจากตัวอย่าง เทคนิคที่สำคัญสำหรับการสร้างเพิ่มขึ้นความคมชัดจากตัวอย่าง ได้แก่ข้ามขั้วแสง , มืด , ความคมชัดขั้นตอนและค่าการรบกวนความคมชัดความสว่าง เทคนิคล่าสุด ( Sarfus ) รวมแสงข้ามโพลาไรซ์และสไลด์ที่เพิ่มความเปรียบต่างเฉพาะสำหรับการแสดงภาพตัวอย่าง นาโนเมตริก

เทคนิคอื่น ๆ[ แก้ไข]

กล้องจุลทรรศน์สมัยใหม่ให้มากกว่าการสังเกตภาพแสงที่ส่งผ่านของตัวอย่าง มีเทคนิคมากมายที่สามารถใช้ในการดึงข้อมูลประเภทอื่น ๆ สิ่งเหล่านี้ส่วนใหญ่ต้องใช้อุปกรณ์เพิ่มเติมนอกเหนือจากกล้องจุลทรรศน์แบบผสมพื้นฐาน

  • แสงสะท้อนหรือเหตุการณ์การส่องสว่าง (สำหรับการวิเคราะห์โครงสร้างพื้นผิว)
  • กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงทั้งสอง:
  • กล้องจุลทรรศน์ Epifluorescence
  • กล้องจุลทรรศน์คอนโฟคอล
  • Microspectroscopy (โดยที่เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่มองเห็นได้ด้วยรังสียูวีถูกรวมเข้ากับกล้องจุลทรรศน์แบบออปติคัล)
  • กล้องจุลทรรศน์อัลตราไวโอเลต
  • กล้องจุลทรรศน์ใกล้อินฟราเรด
  • กล้องจุลทรรศน์แบบส่องผ่านหลายตัว[29]สำหรับการเพิ่มความคมชัดและการลดความคลาด
  • ระบบอัตโนมัติ (สำหรับการสแกนตัวอย่างขนาดใหญ่หรือการจับภาพโดยอัตโนมัติ)

แอปพลิเคชัน[ แก้ไข]

ภาพขยายขนาด 40 เท่าของเซลล์ในการทดสอบ smearทางการแพทย์ที่ถ่ายด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบออปติคัลโดยใช้เทคนิคเมาท์เปียกวางชิ้นงานบนสไลด์แก้วและผสมกับสารละลายเกลือ

กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในไมโครอิเล็กทรอนิกส์นาโนฟิสิกส์เทคโนโลยีชีวภาพการวิจัยทางเภสัชศาสตร์วิทยาแร่วิทยาและจุลชีววิทยา [30]

กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงใช้สำหรับการวินิจฉัยทางการแพทย์สาขาที่เรียกว่าจุลพยาธิวิทยาเมื่อจัดการกับเนื้อเยื่อหรือในการทดสอบรอยเปื้อนบนเซลล์อิสระหรือเศษเนื้อเยื่อ

ในอุตสาหกรรมใช้กล้องจุลทรรศน์แบบสองตาเป็นเรื่องปกติ นอกเหนือจากการใช้งานที่ต้องการการรับรู้เชิงลึกอย่างแท้จริงการใช้แว่นสายตาคู่ยังช่วยลดอาการปวดตาที่เกี่ยวข้องกับวันทำงานที่ยาวนานที่สถานีกล้องจุลทรรศน์ ในการใช้งานบางประเภทกล้องจุลทรรศน์ระยะทำงานระยะไกลหรือโฟกัสไกล[31]มีประโยชน์ อาจต้องตรวจสอบสิ่งของที่อยู่ด้านหลังหน้าต่างมิฉะนั้นวัตถุในโรงงานอุตสาหกรรมอาจเป็นอันตรายต่อวัตถุประสงค์ เลนส์ดังกล่าวมีลักษณะคล้ายกล้องโทรทรรศน์ที่มีความสามารถในการโฟกัสระยะใกล้[32] [33]

กล้องจุลทรรศน์การวัดใช้สำหรับการวัดที่มีความแม่นยำ มีสองประเภทพื้นฐาน เส้นหนึ่งมีเส้นเล็งเพื่อให้สามารถวัดระยะทางในระนาบโฟกัสได้ [34] อีกประเภทหนึ่ง (และเก่ากว่า) มีกากบาทธรรมดาและกลไกไมโครมิเตอร์สำหรับเคลื่อนย้ายวัตถุที่สัมพันธ์กับกล้องจุลทรรศน์ [35]

กล้องจุลทรรศน์แบบพกพาขนาดเล็กมากพบว่ามีการใช้งานบางอย่างในสถานที่ที่กล้องจุลทรรศน์ในห้องปฏิบัติการจะเป็นภาระ [36]

ข้อ จำกัด[ แก้ไข]

ขีด จำกัด การเลี้ยวเบนตั้งอยู่ในหินบนอนุสาวรีย์สำหรับเอิร์นส์ฝรั่งเศส

ที่กำลังขยายสูงมากพร้อมกับแสงที่ส่องผ่านวัตถุจุดจะมองเห็นเป็นแผ่นฟัซซี่ที่ล้อมรอบด้วยวงแหวนการเลี้ยวเบนเหล่านี้เรียกว่าดิสก์โปร่ง อำนาจการแก้ไขของกล้องจุลทรรศน์จะมาเป็นความสามารถในการแยกแยะความแตกต่างระหว่างสองระยะใกล้ดิสก์โปร่ง (หรือในคำอื่น ๆ ความสามารถของกล้องจุลทรรศน์ที่จะเปิดเผยรายละเอียดของโครงสร้างที่อยู่ติดกันเป็นที่แตกต่างกันและที่แยกต่างหาก) ผลกระทบเหล่านี้ของการเลี้ยวเบนที่จำกัดความสามารถในการแก้ไขรายละเอียดอย่างละเอียด ขอบเขตและขนาดของรูปแบบการเลี้ยวเบนได้รับผลกระทบจากทั้งความยาวคลื่นของแสง (λ) วัสดุหักเหที่ใช้ในการผลิตเลนส์ใกล้วัตถุและรูรับแสงที่เป็นตัวเลข(NA) ของเลนส์ใกล้วัตถุ ดังนั้นจึงมีการ จำกัด ขอบเขตเกินกว่าที่มันเป็นไปไม่ได้ที่จะแก้ไขจุดแยกต่างหากในเขตวัตถุประสงค์ที่เรียกว่าขีด จำกัด ของการเลี้ยวเบน สมมติว่าความคลาดเคลื่อนของแสงในการตั้งค่าออปติคัลทั้งหมดมีค่าเล็กน้อยความละเอียดdสามารถระบุได้ดังนี้:

โดยปกติจะถือว่าความยาวคลื่น 550 นาโนเมตรซึ่งสอดคล้องกับแสงสีเขียว ด้วยอากาศเป็นสื่อภายนอกNA ที่ใช้งานได้จริงสูงสุดคือ 0.95 และมีน้ำมันสูงถึง 1.5 ในทางปฏิบัติค่าdต่ำสุดที่หาได้จากเลนส์ทั่วไปคือประมาณ 200 นาโนเมตร เลนส์ชนิดใหม่ที่ใช้การกระเจิงของแสงหลายจุดได้รับอนุญาตให้ปรับปรุงความละเอียดให้ต่ำกว่า 100 นาโนเมตร [37]

เกินขีด จำกัด ความละเอียด[ แก้ไข]

มีเทคนิคหลายอย่างสำหรับการเข้าถึงความละเอียดที่สูงกว่าขีด จำกัด ของแสงที่ส่งผ่านที่อธิบายไว้ข้างต้น เทคนิคโฮโลแกรมตามที่ Courjon และ Bulabois อธิบายไว้ในปีพ. ศ. 2522 ยังสามารถทำลายขีด จำกัด การแก้ปัญหานี้ได้แม้ว่าความละเอียดจะถูก จำกัด ในการวิเคราะห์เชิงทดลองก็ตาม [38]

การใช้ตัวอย่างฟลูออเรสเซนต์มีเทคนิคเพิ่มเติม ตัวอย่าง ได้แก่Vertico SMI , ทุ่งใกล้กล้องจุลทรรศน์แสงซึ่งใช้คลื่นหายไปอย่างรวดเร็วและกระตุ้นการพร่องปล่อยก๊าซเรือนกระจก ในปี 2548 กล้องจุลทรรศน์ที่สามารถตรวจจับโมเลกุลเดี่ยวได้ถูกอธิบายว่าเป็นเครื่องมือในการสอน [39]

แม้จะมีความคืบหน้าอย่างมีนัยสำคัญในทศวรรษที่ผ่านมา แต่เทคนิคในการก้าวข้ามขีด จำกัด การเลี้ยวเบนยังคงมีข้อ จำกัด และมีความเชี่ยวชาญ

ในขณะที่เทคนิคส่วนใหญ่มุ่งเน้นไปที่การเพิ่มความละเอียดด้านข้าง แต่ก็มีเทคนิคบางอย่างที่มีจุดมุ่งหมายเพื่อให้สามารถวิเคราะห์ตัวอย่างที่บางมากได้ ตัวอย่างเช่นวิธีการของsarfus จะวางตัวอย่างบาง ๆ ไว้บนพื้นผิวที่เพิ่มความเปรียบต่างและด้วยเหตุนี้จึงช่วยให้มองเห็นภาพของฟิล์มที่บางถึง 0.3 นาโนเมตรได้โดยตรง

เมื่อวันที่ 8 ตุลาคม 2014 รางวัลโนเบลสาขาเคมีได้มอบให้กับEric Betzig , William MoernerและStefan Hellสำหรับการพัฒนากล้องจุลทรรศน์เรืองแสงที่ได้รับการแก้ไขขั้นสูง [40] [41]

SMI การส่องสว่างที่มีโครงสร้าง[ แก้ไข]

SMI (กล้องจุลทรรศน์ส่องสว่างแบบโมดูเลตเชิงพื้นที่) เป็นกระบวนการทางแสงของวิศวกรรมฟังก์ชันการแพร่กระจายจุด (PSF) ที่เรียกว่า นี่คือกระบวนการที่ปรับเปลี่ยน PSF ของกล้องจุลทรรศน์ในลักษณะที่เหมาะสมเพื่อเพิ่มความละเอียดของแสงเพื่อเพิ่มความแม่นยำในการวัดระยะทางของวัตถุเรืองแสงที่มีขนาดเล็กเมื่อเทียบกับความยาวคลื่นของแสงที่ส่องสว่างหรือเพื่อดึงพารามิเตอร์โครงสร้างอื่น ๆ ใน ช่วงนาโนเมตร [42] [43]

กล้องจุลทรรศน์การแปล SPDMphymod [ แก้ไข]

กล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูง 3 มิติแบบสองสีพร้อม Her2 และ Her3 ในเซลล์เต้านมสีย้อมมาตรฐาน: Alexa 488, Alexa 568 LIMON

SPDM (กล้องจุลทรรศน์ระยะแม่นยำสเปกตรัม) เทคโนโลยีกล้องจุลทรรศน์โลคัลไลเซชันพื้นฐานเป็นกระบวนการทางแสงของกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงซึ่งช่วยให้สามารถวัดตำแหน่งระยะทางและมุมของอนุภาคที่ "แยกด้วยแสง" (เช่นโมเลกุล) ได้ต่ำกว่าขีดจำกัดความละเอียดทางทฤษฎีสำหรับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง "แยกด้วยแสง" หมายความว่า ณ เวลาที่กำหนดจะมีการลงทะเบียนอนุภาค / โมเลกุลเพียงอนุภาคเดียวภายในพื้นที่ที่มีขนาดซึ่งกำหนดโดยความละเอียดทางแสงแบบเดิม (โดยทั่วไปจะมีเส้นผ่านศูนย์กลางประมาณ 200–250 นาโนเมตร) สิ่งนี้เป็นไปได้เมื่อโมเลกุลภายในพื้นที่ดังกล่าวล้วนมีเครื่องหมายสเปกตรัมที่แตกต่างกัน (เช่นสีที่ต่างกันหรือความแตกต่างที่ใช้งานได้อื่น ๆ ในการเปล่งแสงของอนุภาคที่แตกต่างกัน) [44] [45] [46] [47]

สามารถใช้สีย้อมเรืองแสงมาตรฐานหลายชนิดเช่นGFP , Alexa dyes, Atto dyes, Cy2 / Cy3 และโมเลกุลของ fluorescein สำหรับกล้องจุลทรรศน์โลคัลไลเซชันหากมีสภาพทางกายภาพของภาพถ่ายบางอย่าง การใช้เทคโนโลยี SPDMphymod (ฟลูออโรโฟเรสที่ปรับเปลี่ยนได้ทางกายภาพ) ความยาวคลื่นแสงเลเซอร์เดียวที่มีความเข้มที่เหมาะสมเพียงพอสำหรับการสร้างภาพนาโน [48]

กล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูง 3 มิติ[ แก้ไข]

กล้องจุลทรรศน์ความละเอียดสูง 3 มิติที่มีสีย้อมเรืองแสงมาตรฐานสามารถทำได้โดยการรวมกันของกล้องจุลทรรศน์โลคัลไลเซชันสำหรับสีย้อมเรืองแสงมาตรฐาน SPDMphymod และ SMI การส่องสว่างที่มีโครงสร้าง [49]

STED [ แก้ไข]

ภาพจากกล้องจุลทรรศน์การลดการปล่อยสารกระตุ้น (STED) ของเส้นใยแอกตินภายในเซลล์

การลดลงของการปล่อยที่ถูกกระตุ้นเป็นตัวอย่างง่ายๆของความละเอียดที่สูงขึ้นเกินขีด จำกัด การเลี้ยวเบนเป็นไปได้ แต่ก็มีข้อ จำกัด ที่สำคัญ STED เป็นเทคนิคกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงซึ่งใช้การรวมกันของพัลส์แสงเพื่อกระตุ้นให้เกิดการเรืองแสงในกลุ่มย่อยขนาดเล็กของโมเลกุลเรืองแสงในตัวอย่าง แต่ละโมเลกุลจะสร้างจุดของแสงที่ จำกัด การเลี้ยวเบนในภาพและจุดศูนย์กลางของแต่ละจุดเหล่านี้จะตรงกับตำแหน่งของโมเลกุล เนื่องจากจำนวนโมเลกุลของสารเรืองแสงมีน้อยจุดของแสงจึงไม่น่าจะซ้อนทับกันดังนั้นจึงสามารถวางได้อย่างแม่นยำ จากนั้นกระบวนการนี้จะทำซ้ำหลาย ๆ ครั้งเพื่อสร้างภาพ สเตฟานเฮลจาก Max Planck Institute for Biophysical Chemistry ได้รับรางวัล German Future Prize ครั้งที่ 10 ในปี 2006 และรางวัลโนเบลสาขาเคมีในปี 2014 จากการพัฒนากล้องจุลทรรศน์ STED และวิธีการที่เกี่ยวข้อง [50]

ทางเลือก[ แก้ไข]

เพื่อเอาชนะข้อ จำกัด ที่กำหนดโดยขีด จำกัด การเลี้ยวเบนของแสงที่มองเห็นได้กล้องจุลทรรศน์อื่น ๆ ได้รับการออกแบบโดยใช้คลื่นอื่น

  • กล้องจุลทรรศน์แรงอะตอม (AFM)
  • กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด (SEM)
  • การสแกนด้วยกล้องจุลทรรศน์การนำไฟฟ้าอิออน (SICM)
  • การสแกนด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบอุโมงค์ (STM)
  • กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องผ่าน (TEM)
  • กล้องจุลทรรศน์อัลตราไวโอเลต
  • กล้องจุลทรรศน์ X-ray

สิ่งสำคัญคือต้องสังเกตว่าคลื่นความถี่ที่สูงกว่ามีปฏิสัมพันธ์กับสสาร จำกัด ตัวอย่างเช่นเนื้อเยื่ออ่อนมีความโปร่งใสต่อรังสีเอกซ์ซึ่งส่งผลให้แหล่งที่มาของความเปรียบต่างที่แตกต่างกันและการใช้งานเป้าหมายที่แตกต่างกัน

การใช้อิเล็กตรอนและรังสีเอกซ์แทนแสงช่วยให้มีความละเอียดสูงขึ้นมาก - ความยาวคลื่นของรังสีจะสั้นลงดังนั้นขีด จำกัด การเลี้ยวเบนจึงต่ำลง เพื่อให้หัววัดความยาวคลื่นสั้นไม่ทำลายระบบการถ่ายภาพด้วยลำแสงอะตอม ( อะตอมมิกนาโนสโคป ) ได้รับการเสนอและกล่าวถึงอย่างกว้างขวางในวรรณกรรม แต่ก็ยังไม่สามารถแข่งขันกับระบบถ่ายภาพทั่วไปได้

STM และ AFM เป็นเทคนิคการสแกนโพรบโดยใช้หัววัดขนาดเล็กซึ่งสแกนบนพื้นผิวตัวอย่าง ความละเอียดในกรณีเหล่านี้ถูก จำกัด ด้วยขนาดของหัววัด เทคนิคไมโครแมชชีนนิ่งสามารถผลิตโพรบที่มีรัศมีปลาย 5–10 นาโนเมตร

นอกจากนี้วิธีการต่างๆเช่นกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนหรือรังสีเอกซ์จะใช้สุญญากาศหรือสุญญากาศบางส่วนซึ่ง จำกัด การใช้สำหรับตัวอย่างที่มีชีวิตและทางชีววิทยา (ยกเว้นกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดสิ่งแวดล้อม ) ห้องตัวอย่างที่จำเป็นสำหรับเครื่องมือดังกล่าวทั้งหมดยัง จำกัด ขนาดของตัวอย่างและการจัดการตัวอย่างทำได้ยากขึ้น ไม่สามารถมองเห็นสีในภาพที่ทำด้วยวิธีการเหล่านี้ข้อมูลบางอย่างจึงสูญหายไป อย่างไรก็ตามสิ่งเหล่านี้จำเป็นอย่างยิ่งในการตรวจสอบผลกระทบระดับโมเลกุลหรืออะตอมเช่นการแข็งตัวของอายุในโลหะผสมอลูมิเนียมหรือโครงสร้างจุลภาคของโพลีเมอร์

ดูเพิ่มเติม[ แก้ไข]

  • กล้องจุลทรรศน์ดิจิตอล
  • ไฟส่องสว่างKöhler
  • สไลด์กล้องจุลทรรศน์

อ้างอิง[ แก้ไข]

  1. ^ เจอาร์บลูฟอร์ด "บทที่ 2 - หน้า 3 การจำแนกประเภทของกล้องจุลทรรศน์" msnucleus.org. สืบค้นจากต้นฉบับเมื่อ 10 พฤษภาคม 2559 . สืบค้นเมื่อ15 มกราคม 2560 .
  2. ^ Trisha ระบบความรู้ ไอไอทีสถาบันสถาปนา - ฟิสิกส์ชั้น 8, 2 / E Pearson Education อินเดีย น. 213. ISBN 978-81-317-6147-2.
  3. ^ a b เอียนเอ็มวัตต์ (1997) หลักการและการปฏิบัติของกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยเคมบริดจ์ น. 6. ISBN 978-0-521-43591-8.
  4. ^ "ซื้อกล้องจุลทรรศน์ราคาถูกสำหรับใช้ในบ้าน" (PDF) มหาวิทยาลัยอ๊อกซฟอร์ด. เก็บถาวร(PDF)จากเดิมในวันที่ 5 มีนาคม 2016 สืบค้นเมื่อ5 พฤศจิกายน 2558 .
  5. ^ กุมาร, นาเรช; Weckhuysen เบิร์ตเอ็ม; เวนแอนดรูว์เจ; Pollard, Andrew J. (เมษายน 2019). "นาโนถ่ายภาพการใช้สารเคมีเคล็ดลับเพิ่มรามันสเปกโทรสโก" โพรโทคอธรรมชาติ 14 (4): 1169–1193 ดอย : 10.1038 / s41596-019-0132-z . ISSN 1750-2799 PMID 30911174  
  6. ^ ลีจุนฮี; แครมป์ตันเควินที; ทัลลาริดา, นิโคลัส; Apkarian, V.Ara (เมษายน 2019) "การแสดงภาพโหมดปกติของการสั่นสะเทือนของโมเลกุลเดี่ยวด้วยแสงที่ถูกกักขังในอะตอม" ธรรมชาติ . 568 (7750): 78–82 ดอย : 10.1038 / s41586-019-1059-9 . ISSN 1476-4687 PMID 30944493 .  
  7. ^ Aspden รูเบนเอส; เจมเมล, นาธานอาร์.; มอร์ริสปีเตอร์เอ; ทาสกาแดเนียลเอส; เมอร์เทนส์, ลีน่า; แทนเนอร์ไมเคิลจี; เคิร์กวูด, โรเบิร์ตเอ; Ruggeri, อเลสซานโดร; โทซี, อัลแบร์โต้; บอยด์โรเบิร์ตดับเบิลยู; บุลเลอร์เจอรัลด์เอส; ฮัดฟิลด์, โรเบิร์ตเอช; Padgett, Miles J. (2015). "กล้องจุลทรรศน์ Photon-เบาบาง: การถ่ายภาพแสงที่มองเห็นโดยใช้ไฟส่องสว่างอินฟราเรด" (PDF) Optica . 2 (12): 1049. ดอย : 10.1364 / OPTICA.2.001049 . ISSN 2334-2536  
  8. ^ Atti Della Fondazione Giorgio Ronchi E Contributi Dell'Istituto Nazionale Di Ottica เล่ม 30, La Fondazione-1975, หน้า 554
  9. ^ อัลเบิร์ตแวนเฮลเดน; สเวนดูปรี; Rob van Gent (2010). ต้นกำเนิดของกล้องโทรทรรศน์ สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยอัมสเตอร์ดัม น. 24. ISBN 978-90-6984-615-6.
  10. ^ วิลเลียมโรเซนธาล, แว่นตาและอื่น ๆ การมองเห็น:. ประวัติความเป็นมาและคู่มือการจัดเก็บภาษี, นอร์แมน Publishing, 1996, หน้า 391-392
  11. ^ a b c Raymond J. Seeger, Men of Physics: Galileo Galilei, His Life and His Works, Elsevier - 2016, หน้า 24
  12. ^ a b c J. William Rosenthal, แว่นตาและอุปกรณ์ช่วยในการมองเห็นอื่น ๆ : ประวัติและแนวทางในการรวบรวม, Norman Publishing, 1996, หน้า 391
  13. ^ อัลเบิร์ตแวนเฮลเดน; สเวนดูปรี; Rob van Gent (2010). ต้นกำเนิดของกล้องโทรทรรศน์ สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยอัมสเตอร์ดัม หน้า 32–36, 43. ISBN 978-90-6984-615-6.
  14. ^ Van Heldenพี 43
  15. ^ Shmaefsky ไบรอัน (2006)เทคโนโลยีชีวภาพ 101 กรีนวูด. น. 171.ไอ0313335281 . 
  16. ^ หมายเหตุ: เรื่องราวแตกต่างกันไปรวมถึง Zacharias Janssen ได้รับความช่วยเหลือจาก Hans Martens พ่อของเขา (หรือบางครั้งก็บอกว่าสร้างโดยพ่อของเขาทั้งหมด) วันเกิดที่น่าจะเป็นไปได้ของ Zacharias ในปี 1585 ( Van Helden , หน้า 28) ทำให้ไม่น่าเป็นไปได้ที่เขาจะประดิษฐ์ขึ้นในปี 1590 และการอ้างสิทธิ์ในการประดิษฐ์ขึ้นอยู่กับคำให้การของลูกชายของ Zacharias Janssen, Johannes Zachariassen ซึ่งอาจสร้างเรื่องราวทั้งหมด ( Van เฮลเดนหน้า 43)
  17. ^ ไบรอัน Shmaefsky เทคโนโลยีชีวภาพ 101 - 2006, หน้า 171
  18. ^ "ใครเป็นผู้คิดค้นกล้องจุลทรรศน์" . สืบค้นจากต้นฉบับเมื่อวันที่ 3 กุมภาพันธ์ 2017 . สืบค้นเมื่อ31 มีนาคม 2560 .
  19. ^ โรเบิร์ตเฮียร์ไจแอนต์เดลฟ์: Johannes Vermeer และนักปรัชญาธรรมชาติ: ค้นหาแบบขนานสำหรับความรู้ในช่วงอายุของการค้นพบ Bucknell มหาวิทยาลัยกด - 2003, หน้า 126
  20. ^ A. Mark Smith, From Sight to Light: The Passage from Ancient to Modern Optics, University of Chicago Press - 2014, หน้า 387
  21. ^ แดเนียลเจ Boorstin การค้นพบ, Knopf กลุ่มสำนักพิมพ์ดับเบิล - 2011, หน้า 327
  22. ^ โกลด์สตีเฟนเจย์ (2000) "บทที่ 2: คมคมกริบโดยธรรมชาติ" นอนหินช: Penultimate สะท้อนในประวัติศาสตร์ธรรมชาติ New York, NY: ความสามัคคี ISBN 978-0-224-05044-9.
  23. ^ "Il microscopio ดิกาลิเลโอ" ที่เก็บไว้ 9 เมษายน 2008 ที่เครื่อง Wayback , Instituto อีพิพิธภัณฑ์ดิสโทเรียเดลลา Scienza (ในอิตาลี)
  24. ^ โกลด์สตีเฟนเจย์ (2000)โกหกหินร์ราเกช หนังสือ Harmony ISBN 0-609-60142-3 . 
  25. ^ ริดเดลล์ JL (1854) "บนกล้องจุลทรรศน์สองตา". QJ Microsc วิทย์ . 2 : 18–24.
  26. ^ Cassedy JH (1973) "ลูกหนูวิบริโอของจอห์นแอล. ริดเดลล์: เอกสารสองฉบับเกี่ยวกับกล้องจุลทรรศน์อเมริกันและสาเหตุของอหิวาตกโรค 1849–59" J Hist Med . 28 (2): 101–108.
  27. ^ วิธีการใช้กล้องจุลทรรศน์สารประกอบ ที่เก็บไว้ 1 กันยายน 2013 ที่เครื่อง Wayback microscope.com
  28. ^ เคนเน็ ธ ฤดูใบไม้ผลิ; เคลเลอร์เอชเอิร์นส์; เดวิดสัน, ไมเคิลดับบลิว"วัตถุประสงค์กล้องจุลทรรศน์" ศูนย์ทรัพยากรกล้องจุลทรรศน์โอลิมปัสืบค้นจากต้นฉบับเมื่อ 1 พฤศจิกายน 2551 . สืบค้นเมื่อ29 ตุลาคม 2551 .
  29. ^ NC Pégardและ JW Fleischer, "Contrast Enhancement by Multi-Pass Phase-Conjugation Microscopy," CLEO: 2011, paper CThW6 (2011)
  30. ^ O1 Optical Microscopy เก็บถาวรเมื่อ 24 มกราคม 2554 ที่ Wayback Machineโดย Katarina Logg แผนก Chalmers ฟิสิกส์ประยุกต์. 20 มกราคม 2549
  31. ^ "กล้องจุลทรรศน์ยาวโฟกัสกับอะแดปเตอร์กล้อง" macrolenses.de สืบค้นจากต้นฉบับเมื่อ 3 ตุลาคม 2554.
  32. ^ "Questar Maksutov กล้องจุลทรรศน์" company7.com . ที่เก็บถาวรจากเดิมเมื่อวันที่ 15 มิถุนายน 2011 สืบค้นเมื่อ11 กรกฎาคม 2554 .
  33. ^ "เอฟทีเอกล้องจุลทรรศน์ยาวโฟกัส" firsttenangstroms.com . ที่เก็บถาวรจากเดิมเมื่อวันที่ 26 กุมภาพันธ์ 2012 สืบค้นเมื่อ11 กรกฎาคม 2554 .
  34. ^ Gustaf Ollsson, เรติเคิล,สารานุกรมวิศวกรรมออฟติคัลฉบับ 3 , CRC, 2546; หน้า 2409.
  35. ^ ภาคผนวก Aวารสาร Royal Microscopical Society 2449; หน้า 716 การอภิปรายเกี่ยวกับกล้องจุลทรรศน์วัด Zeiss
  36. ^ ลินเดอ, Courtney (22 พฤศจิกายน 2019) "ถ้าคุณต้องการที่เคยมาร์ทโฟนกล้องจุลทรรศน์ตอนนี้เป็นโอกาสของคุณ" โครงสร้างนิยม สืบค้นเมื่อ3 พฤศจิกายน 2563 .
  37. ^ Van Putten, EG; อักบุลุต, ง.; เบอร์โทลอตติเจ.; โว, WL; Lagendijk, ก.; ยุง, AP (2011). "เลนส์กระจายช่วยแก้ไขโครงสร้างต่ำกว่า 100 นาโนเมตรด้วยแสงที่มองเห็นได้" ทางกายภาพจดหมายรีวิว 106 (19): 193905. arXiv : 1103.3643 Bibcode : 2011PhRvL.106s3905V . ดอย : 10.1103 / PhysRevLett.106.193905 . PMID 21668161 
  38. ^ Courjon, D.; บูลาโบอิส, เจ. (2522). "กล้องจุลทรรศน์โฮโลแกรมแบบเรียลไทม์โดยใช้ระบบส่องสว่างโฮโลแกรมที่แปลกประหลาดและอินเตอร์เฟอโรมิเตอร์แบบโรตารี่" วารสารทัศนศาสตร์ . 10 (3): 125. Bibcode : 1979JOpt ... 10..125C . ดอย : 10.1088 / 0150-536X / 10/3/004 .
  39. ^ "สาธิตของต้นทุนต่ำโมเลกุลเดี่ยวที่มีความสามารถมัลติ Optical Microscope" สืบค้นจากต้นฉบับเมื่อวันที่ 6 มีนาคม 2552 . สืบค้นเมื่อ25 กุมภาพันธ์ 2552 .
  40. ^ ริทคาร์ล; ดาวรุ่งมาลิน (8 ตุลาคม 2557). "ชาวอเมริกัน 2 คนเยอรมันชนะ 1 รางวัลโนเบลสาขาเคมี" . ข่าวเอพี . สืบค้นจากต้นฉบับเมื่อวันที่ 11 ตุลาคม 2557 . สืบค้นเมื่อ8 ตุลาคม 2557 .
  41. ^ ช้างเคนเน ธ (8 ตุลาคม 2014) "2 ชาวอเมริกันและชาวเยอรมันที่ได้รับรางวัลรางวัลโนเบลสาขาเคมี" นิวยอร์กไทม์ส . สืบค้นจากต้นฉบับเมื่อวันที่ 9 ตุลาคม 2557 . สืบค้นเมื่อ8 ตุลาคม 2557 .
  42. ^ Heintzmann เรนเนอร์ (1999) modulated ขวางกล้องจุลทรรศน์กระตุ้นปรับปรุงมติโดยใช้ตะแกรงเลนส์ การตรวจชิ้นเนื้อด้วยแสงและเทคนิคทางกล้องจุลทรรศน์ III. 3568 . หน้า 185–196 ดอย : 10.1117 / 12.336833 .
  43. ^ Cremer คริสตอฟ; เฮาส์มันน์, ไมเคิล; Bradl, Joachim และ Schneider, Bernhard "กล้องจุลทรรศน์สนามคลื่นพร้อมฟังก์ชันการกระจายจุดตรวจจับ"สิทธิบัตรสหรัฐอเมริกา 7,342,717วันที่มีลำดับความสำคัญ 10 กรกฎาคม 1997
  44. ^ เลมเมอร์พี; Gunkel, ม.; แบดเดลีย์, D.; คอฟมานน์, R.; ยูริช, ก.; Weiland, Y.; เรย์มันน์เจ.; มึลเลอร์พี; เฮาส์มันน์, ม.; Cremer, C. (2551). "SPDM: กล้องจุลทรรศน์แบบเบาที่มีความละเอียดโมเลกุลเดี่ยวในระดับนาโน" ฟิสิกส์ประยุกต์ข . 93 (1): 1–12. Bibcode : 2008ApPhB..93 .... 1 ล . ดอย : 10.1007 / s00340-008-3152-x .
  45. ^ Bradl โจอาคิม (1996) "การศึกษาเปรียบเทียบความแม่นยำในการแปลสามมิติในการสแกนด้วยเลเซอร์คอนโฟคอลแบบเดิมและกล้องจุลทรรศน์แสงเรืองแสงเอกซ์เรย์ตามแนวแกน" ใน Bigio เออร์วิงเจ; กรุนด์เฟสต์วอร์เรนเอส; ชเนคเคนเบอร์เกอร์เฮอร์เบิร์ต; สวานเบิร์ก, คาทาริน่า; Viallet, Pierre M (eds.) Biopsies แสงและเทคนิคกล้องจุลทรรศน์การตรวจชิ้นเนื้อด้วยแสงและเทคนิคทางกล้องจุลทรรศน์2926 . หน้า 201–206 ดอย : 10.1117 / 12.260797 .
  46. ^ Heintzmann วิจัย .; มึนช์, H.; Cremer, C. (1997). "การวัดความแม่นยำสูงในการใช้กล้องจุลทรรศน์ epifluorescent - การจำลองและการทดลอง" (PDF) วิสัยทัศน์ของเซลล์ 4 : 252–253 ที่เก็บถาวร(PDF)จากต้นฉบับเมื่อ 16 กุมภาพันธ์ 2559
  47. ^ Cremer คริสตอฟ; เฮาส์มันน์, ไมเคิล; Bradl, Joachim and Rinke, Bernd "วิธีการและอุปกรณ์สำหรับการวัดระยะทางระหว่างโครงสร้างวัตถุ",สิทธิบัตรสหรัฐอเมริกา 6,424,421วันที่มีลำดับความสำคัญ 23 ธันวาคม 2539
  48. ^ มานูเอลกันเคิล; และคณะ (2552). "กล้องจุลทรรศน์โลคัลไลเซชันสองสีของโครงสร้างนาโนระดับเซลล์" (PDF) วารสารเทคโนโลยีชีวภาพ . 4 (6): 927–38 ดอย : 10.1002 / biot.200900005 . PMID 19548231  
  49. ^ Kaufmann, R; มึลเลอร์, พี; ฮิลเดนแบรน, G; เฮาส์มันน์, ม; เครเมอร์, C; และคณะ (2554). "การวิเคราะห์กลุ่มโปรตีนเมมเบรน Her2 / neu ในเซลล์มะเร็งเต้านมประเภทต่างๆโดยใช้กล้องจุลทรรศน์เฉพาะที่" วารสารจุลทรรศน์ . 242 (1): 46–54 CiteSeerX 10.1.1.665.3604 ดอย : 10.1111 / j.1365-2818.2010.03436.x . PMID 21118230  
  50. ^ "รางวัลอนาคตเยอรมันฝรั่งเศสข้ามขีด จำกัด" สืบค้นเมื่อ 7 มีนาคม 2552 . สืบค้นเมื่อ24 กุมภาพันธ์ 2552 .

แหล่งที่มาที่อ้างถึง[ แก้ไข]

  • ฟานเฮลเดน, อัลเบิร์ต; ดูเพร, สเวน; Van Gent, Rob (2011). ต้นกำเนิดของกล้องโทรทรรศน์ สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยอัมสเตอร์ดัม ISBN 978-9069846156.

อ่านเพิ่มเติม[ แก้ไข]

  • "การเตรียมชิ้นงานโลหะและวัสดุ, กล้องจุลทรรศน์แสง, การวิเคราะห์ภาพและการทดสอบความแข็ง", Kay Geels ร่วมกับ Struers A / S, ASTM International 2006
  • "Light Microscopy: การปฏิวัติร่วมสมัยที่กำลังดำเนินอยู่" , Siegfried Weisenburger และ Vahid Sandoghdar, arXiv: 1412.3255 2014

ลิงก์ภายนอก[ แก้ไข]

  • Antique Microscopes.comแหล่งรวมกล้องจุลทรรศน์ในยุคแรก ๆ
  • กล้องจุลทรรศน์ในประวัติศาสตร์คอลเลคชันภาพประกอบที่มีภาพถ่ายกล้องจุลทรรศน์วิทยาศาสตร์มากกว่า 3000 ภาพโดยผู้ผลิตชาวยุโรป(เป็นภาษาเยอรมัน)
  • The Golub Collectionซึ่งเป็นคอลเล็กชันของกล้องจุลทรรศน์ในศตวรรษที่ 17 ถึง 19 รวมถึงคำอธิบายที่ครอบคลุม
  • Molecular Expressionsแนวคิดในกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง
  • การสอนออนไลน์เกี่ยวกับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงในทางปฏิบัติ
  • OpenWetWare
  • ฐานข้อมูลที่เป็นศูนย์กลางของเซลล์